| 產品名稱 |
人卵巢癌組織源性原代細胞 |
| 商品貨號 |
MZ-4278 |
| 組織來源 |
中國成年病人手術后的卵巢癌組織。 |
| 規格 |
5×105cells/T25培養瓶 |
| 生長特性 |
貼壁 |
| 細胞污染 |
HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌檢測陰性。 |
| 細胞傳代步驟 |
如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養瓶中，置于37℃培養箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。 |
| 細胞復蘇步驟 |
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。 |
| 細胞凍存步驟 |
待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶，細胞變圓脫落后，加入2ml完全培養基終止消化，可使用血球計數板計數。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
| 病理分類 |
1、漿液性囊腺癌為惡性卵巢腫瘤最常見者。2/3 為雙側性，其癌細胞常以形成囊腔和乳頭 為特征，但或多或少仍保留原來的組織形態。有的形成大量有規則小囊腔，有時上皮突入腔 內形成上皮簇或乳頭的傾向。 組織分級：高分化（Ⅰ級）、中分化（Ⅱ級）、低分化（Ⅲ級）。 2、粘液性囊腺癌多房性較多，雙側雖不多，但在卵巢粘液性腫瘤中較良性多，約有5%～ 40%。外觀光滑、圓形或呈分葉狀，切面囊性、多房，伴有實性區域。囊內壁可見乳頭，但 較漿性癌少。囊腔內含血性膠狀粘液，實性區常見出血壞死。鏡下特點為：①上皮復層超過 3 層；②上皮重度非典型增生，伴有粘液分泌異常；③腺體有背靠現象；④核分裂活躍；⑤ 間質浸潤。 組織分級： （1）高分化（Ⅰ級）：上皮高柱形，上皮增生超過3 層。乳頭分支細長，形態不規則，間質 極少。乳頭表面細胞失極性，排列紊亂，核大小不等，分裂相多。有時粘液分泌過多逸出細 胞外，使細胞質界限消失。 （2）中分化（Ⅱ級）：上皮柱狀或低柱狀，形成共壁，細胞內有少量粘液，間質內有大量細 胞巢浸潤，核分裂相較多。 （3）低分化（Ⅲ級）：腺樣結構不明顯，上皮細胞呈簇狀或彌漫性生長，細胞核異型性明顯， 核分裂相更多。細胞內粘液極少。 3、惡性宮內膜樣癌腫瘤55%～60%為單側，囊實性或大部分實性，囊液多為血性，有時伴 有巧克力囊腫。外形光滑或結節狀，或有表面乳頭生長。鏡下表現與子宮內膜癌相似，常見 鱗狀上皮化生。根據腺體形態排列結構及細胞分化程度，腫瘤可分成3 級： （1）高分化（Ⅰ級）：分化較好，以腺體結構為主，有少量核分裂相。 （2）中分化（Ⅱ級）：實性部分占1/2，腺體形態不規則，有多量小腺體彼此相連，核分裂 相明顯。 （3）低分化（Ⅲ級）：腺體結構已很少見，腫瘤細胞大量增生，破壞了腺腔，形成彌漫一片， 核分裂相增多。 4、惡性透明細胞瘤多為囊實性，質韌不十分硬，大小不等，單側多，雙側可達24%。切 面呈魚肉狀，或淡黃色。常伴有出血壞死。仔細檢查，常可發現子宮內膜異位。鏡下可見透 明細胞、鞋釘細胞及嗜酸性粒細胞。細胞核有異形，可見核分裂相。 5、未成熟畸胎瘤腫瘤多為單側巨大腫物，包膜光滑，但常與周圍組織有粘連或在手術中易 撕裂。切面多以實性為主，伴有囊性區；偶見以囊為主者，囊壁有實性區域。實性區質軟、 細膩、有出血壞死呈雜色多彩狀，有時見骨、軟骨、毛發或腦組織；囊性區通常充以漿液、 粘液或膠凍樣物。 鏡下見腫瘤由來自三胚層的成熟和未成熟組織構成；外胚層主要是神經組織和皮膚，中胚層 以纖維結締組織、軟骨、骨、肌肉和未分化的間葉組織為多見，內胚層主要為腺管樣結構， 有時可見支氣管或胃腸上皮。這些組織處于不同的成熟階段，無器官樣排列。未成熟組織主 要是指神經上皮組織，可形成菊形團或神經管結構，也可彌漫成片。根據腫瘤中這種神經上 皮的含量，Norris 等（1976）提出未成熟畸胎瘤的分級方法，這種分級對治療和預后判斷均 有重要意義。 0 級：全部為成熟組織。 Ⅰ級：有少量不成熟組織（主要是膠質和原始間充質），可見核分裂。神經上皮少，每一切 片中僅限于1 個/40 倍視野。 Ⅱ級：有較多未成熟組織，每一切片中神經上皮的量占4 個或更多/40 倍視野，并常與肉瘤 樣的間質融合。 6、無性細胞瘤腫瘤多為單側，中等大小，呈圓形、分葉狀，包膜光滑，切面灰白色、質實， 可有壞死出血。鏡下見被結締組織分隔的大圓形或多角形細胞群，周圍有淋巴細胞浸潤。此 瘤常出現各種性腺功能低下或雌雄間體現象。 7、卵巢內胚竇瘤（卵黃囊瘤） 多數為單側，雙側多為轉移所致。腫瘤通常體積較大，直徑 多超過10cm，呈圓形或卵圓形，表面光滑，包膜完整，切面灰白，組織脆，間質有膠狀粘 液，伴出血，壞死，易破裂。鏡下結構復雜，主要為疏松網狀結構和內胚竇樣結構。瘤細胞 呈扁平、立方、柱狀或多角形。 8、顆粒細胞瘤最常見的一種卵巢性索間質腫瘤。為低度惡性腫瘤。多為單側，大小不一， 表面光滑或分葉狀，切面實性，色淡黃，一部分呈囊性變，有時有出血壞死。組織學特點是 顆粒細胞圍繞小囊呈放射狀排列。顆粒細胞瘤具有內分泌功能，分泌雌激素，青春期前出現 假性早熟，生育年齡引起月經紊亂，絕經期后內膜增生過長，甚至發生腺癌。 |
